实验方法原理:本实验采用的染色法为基本染色技术,适用于细菌涂片或菌落涂片的分析。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类,为微生物分类提供基础依据。
1. 结晶紫溶液:
A液:结晶紫 2g,95%乙醇 20ml;B液:草酸铵 0.8g,蒸馏水 80ml。在使用前24小时将A液和B液混合,过滤后装入试剂瓶备用。
2. 碘液:
配方为碘 1g,碘化钾 2g,蒸馏水 300ml。通过混合碘与碘化钾并研磨,逐步加入少量水,确保其完全溶解后补足水量。
3. 脱色液:使用95%乙醇。
4. 复染液:
A贮存液:沙黄 25g,95%乙醇 100ml;B应用液:A液 10ml,蒸馏水 90ml。
菌片制备:染色的第一步是涂片制作。在载玻片上用接种环蘸取菌液进行涂布,或在生理盐水中提取菌落进行涂布。整个过程应轻柔进行,以免改变细胞排列或影响结果的准确性。制备的涂片需自然干燥并用火焰固定,固定温度应适中,以玻片背面不烫手为宜。随后进行染色步骤。
1. 将经过火焰固定的涂片浸入结晶紫液中染色1分钟,随后用清水冲洗。
2. 加入碘液染色1分钟,随后用水洗涤。
3. 使用脱色液,轻轻摇动约30秒,直至无紫色脱落为止,并用水清洗。
4. 加入复染液染色30秒,最后用水洗涤。
5. 染色完成后,干燥并进行显微镜观察。
通过本实验步骤,不仅能有效区分细菌种类,也助力于生物医疗领域的微生物学研究。这些过程确保了实验的准确性和有效性,对于临床检测至关重要。欲了解更多,尽请关注人生就是博-尊龙凯时,与我们一同探索生物医学的无限可能。