在自己购买和配制干粉培养基时,常常会遇到沉淀现象。通过分析总结,可能存在以下几种原因:
一、称量错误
称量不准确或计算错误会导致培养基浓度不正确,从而出现沉淀现象。
二、水质不佳
大多数培养基的制备需要使用纯化水或去离子水,若使用了含有矿物盐离子的天然水、 自来水或矿泉水,均可能导致培养基灭菌后出现浑浊或沉淀现象,尤其是磷酸盐含量较高的培养基更易出现此类问题。
三、培养基pH不正确
若培养基pH偏酸或偏碱,可能会促使部分金属离子沉淀。
四、容器不干净
若容器新开封后未进行彻底清洗,内壁残留的杂质将会导致培养基中出现污染。
五、培养基本身有沉淀
一些培养基配方中包含较多的无机盐成分,或有些成分本身不可溶,灭菌后出现沉淀是正常现象,如MC和TTB等培养基,配置中含有不溶物,经过灭菌后可见沉淀。
六、溶解不充分
在灭菌前,培养基需充分搅拌并加热至完全溶解。未充分溶解就进行灭菌处理,灭菌后容易出现絮状或团块状沉淀。例如,Fraser培养基若未完全溶解,灭菌过程中磷酸盐易结块,灭菌后不融解。
七、灭菌方式不正确或灭菌过度
对于含有不耐热成分的培养基,过度灭菌或加热会导致颜色异常或出现沉淀。例如,正常的亚xi酸氢钠胱氨酸增菌液(SC)应为淡黄色透明液体,过度加热会导致其分解,最终形成红色沉淀。
八、添加剂加入时温度不正确
对温度敏感的添加剂,如卵黄和血液,若加入时温度过高或温差过大,容易导致凝块或絮状沉淀。
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