人生就是博-尊龙凯时提供的SV40转染人成骨细胞HFOB119培养说明书旨在为科研工作者提供详细的细胞培养指导。以下是针对该细胞的培养条件和操作流程的详细说明。

一、细胞培养条件

细胞名称：SV40转染人成骨细胞HFOB119

生长特性：贴壁生长

冻存条件：使用无血清冻存液（货号：C7001）

培养体系：DMEM/F12 + 0.3 mg/ml G418 + 10% FBS

传代方法：首次传代建议采用1:2比例。如观察到细胞状态不佳，可考虑直接购买我们的完全培养基进行对比实验。

二、细胞处理和培养步骤

收到细胞后，请在细胞状态良好的情况下，灌满完全培养液并封好瓶口，以确保细胞在运输过程中的最佳生长状态。接收细胞时，使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，随后将其置于超净台中，采取严格的无菌操作。放入培养箱中，于33℃、5% CO2条件下静置3-4小时，以稳定细胞状态，随后进行微观观察并拍照保存。

细胞传代

当细胞汇合度未超过80%时，收集培养液至离心管中，保留5ml完全培养基进行后续培养。如果细胞密度超过80%，请按照以下步骤进行传代：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态。
3. 当细胞大部分脱落时，增加5ml以上完全培养基以终止消化反应。
4. 将悬液转移至离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml完全培养基重悬。
5. 依据1:2比例分瓶传代（两个T25瓶），补充新完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入培养箱中继续培养。

细胞冻存

当细胞生长至覆盖培养瓶的80%时，弃去培养液，并用PBS清洗；接着，添加0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶，待细胞变圆后，用5ml完全培养液终止消化。将悬液转移至离心管中，离心后加1ml雅吉生物无血清冻存液，混合均匀放入冻存管中，直接置于-80℃冰箱保存。

细胞复苏

从液氮中取出冻存管，迅速放入33℃水浴解冻，随后将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中，离心后重悬，接种至T25培养瓶中，放入培养箱中培养。第二天更换新鲜培养基以继续培养。

三、注意事项

在细胞运输过程中，可能会由于细胞贴壁不牢导致细胞脱落，属于正常现象。如脱落较多，按建议步骤进行沉淀和重悬，以确保细胞的活力。

四、售后条款

具体问题的处理标准如下：

1. 如因运输问题导致的细胞丢失、瓶破损等，允许重发。
2. 细胞污染需在收到后48小时内提供实验结果，确认后重新发货。
3. 活性问题需在7天内验证，符合条件重发。

人生就是博-尊龙凯时致力于为科研人员提供优质的细胞产品及服务，期待在您的科研工作中助您一臂之力！