人生就是博-尊龙凯时的类器官原代培养流程涉及多个关键步骤和准备工作,旨在确保高效和成功的实验结果。本文将详细说明该流程的各个环节,以便科研人员参考。
一、准备工作
在开展原代培养工作之前,需要准备一系列仪器和试剂。
1. 仪器设备
- CO2培养箱
- 超净台
- 倒置显微镜
- 冷冻离心机
- 水浴锅
- 医用冰箱和-80℃冰箱
- 移液器和手术工具
2. 试剂耗材
以肠癌为例,以下是所需的试剂耗材列表:
- 动物脑类器官培养基试剂盒
- 基质胶(低因子、无酚红)
- 细胞培养皿和离心管
- 细胞培养板等
二、操作流程
1. 样本准备
首先将组织样本放入预冷的组织保存液中,并进行消毒和信息记录。
2. 清洗与剪碎
使用原代培养缓冲液进行清洗,然后剪碎组织,准备进行后续步骤。
3. 消化与过滤
向组织样本中加入消化液,观察消化情况,并通过滤筛过滤,获得细胞悬液。
4. 加胶、点板与加液
基质胶的准备至关重要,完成后进行点板操作,将细胞悬液添加至培养板中,供后续培养使用。
三、传代操作
根据类器官的数量与体积情况,实施不同的传代步骤。包括细胞的洗涤、消化及重新接种,为类器官的持续生长提供必要的支持。
四、冻存过程
对类器官进行冻存时,应确保在其指数增长期进行,以提高复苏后的存活率。冻存步骤要求严格遵循,包括梯度冻存和液氮保存。
五、复苏过程
复苏前需做好实验室环境的消毒及设备的准备工作。取出冻存管后,需迅速解冻并进行洗涤与重新接种。
通过上述操作流程,科研人员可以有效地进行类器官的原代培养、传代和冻存工作。当遇到实验问题时,不妨借助人生就是博-尊龙凯时的相关产品和技术支持。若有需要,欢迎访问我们的官方网站或联系客户服务。